1.項(xiàng)目背景
1.1臨床介紹
1.1.1雌二醇簡介
雌二醇（Estradiol，簡稱E2）是一種類固醇激素，屬于雌激素家族中活性最強(qiáng)、生物活性最高的成員。它在人體內(nèi)的主要來源如下：
女性：主要由卵巢的卵泡、黃體分泌，妊娠期婦女的胎盤也會大量產(chǎn)生。
男性：少量由腎上腺皮質(zhì)和睪丸間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生。
1.1.2臨床意義
雌二醇檢測在臨床中具有重要價值，主要用于以下幾個方面：
a.評估卵巢功能：通過檢測不同階段的雌二醇水平，結(jié)合卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）等指標(biāo)，可判斷卵巢的儲備功能、卵泡發(fā)育情況及排卵狀態(tài)。例如，卵泡期雌二醇水平過低可能提示卵巢功能減退。
b.診斷婦科疾?。河兄谠\斷多囊卵巢綜合征、卵巢早衰、閉經(jīng)、子宮內(nèi)膜異位癥等疾病。如卵巢早衰患者，雌二醇水平通常明顯降低，同時FSH升高。
c.監(jiān)測生育相關(guān)問題：在輔助生殖技術(shù)（如試管嬰兒）中，監(jiān)測雌二醇水平可指導(dǎo)促排卵治療，確定取卵時機(jī)，評估卵泡質(zhì)量。
d.孕期管理：妊娠期間，雌二醇水平會顯著升高，其變化可反映胎盤功能和胎兒發(fā)育情況。異常升高或降低可能與妊娠高血壓、先兆流產(chǎn)等風(fēng)險相關(guān)。
e.診斷內(nèi)分泌紊亂：雌二醇水平異常可能與甲狀腺功能異常、腎上腺疾病等內(nèi)分泌疾病有關(guān)，需結(jié)合其他檢查綜合判斷。
f.評估更年期癥狀：絕經(jīng)后女性雌二醇水平下降，可能出現(xiàn)潮熱、出汗、情緒波動、骨質(zhì)疏松等癥狀。檢測雌二醇可幫助評估更年期狀態(tài)，指導(dǎo)激素替代治療。
1.2小分子雙抗體夾心法
2024年公開專利CN117871874A《小分子物質(zhì)免疫檢測方法》對小分子夾心法的反應(yīng)原理做了詳細(xì)闡述，摘抄部分內(nèi)容如下。
本發(fā)明提出了一種小分子物質(zhì)免疫檢測方法，其特征在于，包括：（1）將含有小分子物質(zhì)的樣本、配體、第二抗體和表面活性劑進(jìn)行反應(yīng)，得到小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物，且所述小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物中小分子物質(zhì)誘導(dǎo)配體形成至少一個新的構(gòu)象表位，所述第二抗體可特異性結(jié)合所述至少一個新的構(gòu)象表位，所述表面活性劑可消除所述第二抗體與構(gòu)象未改變的配體之間的結(jié)合；（2）檢測所述小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物。
樣本中的小分子物質(zhì)與配體發(fā)生特異性結(jié)合，得到小分子物質(zhì)-配體復(fù)合物，并且小分子物質(zhì)-配體復(fù)合物中小分子物質(zhì)誘導(dǎo)配體形成至少一個新的構(gòu)象表位。小分子物質(zhì)-配體復(fù)合物與第二抗體和表面活性劑反應(yīng)，第二抗體特異性地與形成新構(gòu)象表位的配體結(jié)合，同時也會與構(gòu)象未改變的配體產(chǎn)生弱結(jié)合。表面活性劑可消除第二抗體與構(gòu)象未改變的配體之間的結(jié)合，得到小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物。通過檢測三元復(fù)合物，可以實(shí)現(xiàn)小分子物質(zhì)檢測。由此，采用雙抗體夾心法可以提高檢測準(zhǔn)確性和靈敏度，不同濃度梯度樣本檢測區(qū)分度高。同時，減少了篩選高特異性復(fù)合物抗體的難度，更有利于小分子物質(zhì)檢測試劑盒的大規(guī)模生產(chǎn)和檢測，應(yīng)用價值高。
2.性能表現(xiàn)
針對E2的檢測，西寶生物推出2株E2抗體（小分子雙抗體夾心法）、1款E2標(biāo)準(zhǔn)品及3種解離劑。
具體性能如下（以下評估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗(yàn)證，建議客戶根據(jù)自身工藝進(jìn)行更為詳細(xì)的驗(yàn)證）。
2.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺
組合1：
雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）包被羧基磁珠+雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）標(biāo)記吖啶酯+E2解離劑（AE發(fā)光專用）（貨號：DCH0213A）；
線性范圍：5pg/mL-3000pg/mL；最低檢出限：5pg/mL；HOOK：100000pg/mL。
2.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺
組合2：
雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）包被羧基磁珠+雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）標(biāo)記堿性磷酸酶+E2解離劑（AP發(fā)光專用）（貨號：DCH0213B）；
線性范圍：5pg/mL-3000pg/mL；最低檢出限：5pg/mL；HOOK：100000pg/mL。
2.3熒光免疫層析平臺
組合3：
雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）標(biāo)記熒光微球+雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）劃膜+E2解離劑（層析專用，貨號：DCH0213C）（含E2熒光處理劑（層析專用），貨號：DCH0214A）；
線性范圍：20pg/mL-3000pg/mL；最低檢出限：20pg/mL；HOOK：50000pg/mL。
2.4各組分穩(wěn)定性評估
2.4.1采用E2磁珠稀釋液（化學(xué)發(fā)光）將磁珠包被的E2抗體濃縮液配制成工作液進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
2.4.2采用E2磁珠稀釋液（化學(xué)發(fā)光）將吖啶酯標(biāo)記的E2抗體濃縮液配制成工作液進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
2.4.3采用E2堿性磷酸酶稀釋液（化學(xué)發(fā)光）（含蛋白保護(hù)劑GH，貨號DCL0009A）將堿性磷酸酶標(biāo)記的E2抗體濃縮液配制成工作液進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
2.4.4采用E2標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液（化學(xué)發(fā)光）將E2標(biāo)準(zhǔn)品配制成梯度進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
如表1所示：
a.磁珠包被E2抗體工作液單獨(dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值平均變化在±10%以內(nèi)，表明磁珠包被E2抗體工作液熱穩(wěn)定性良好；
b.吖啶酯標(biāo)記E2抗體工作液單獨(dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值平均變化在±15%以內(nèi)，表明吖啶酯標(biāo)記E2抗體工作液熱穩(wěn)定性良好；
c.堿性磷酸酶標(biāo)記E2抗體工作液單獨(dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值平均變化在±15%以內(nèi)，表明堿性磷酸酶標(biāo)記E2抗體工作液熱穩(wěn)定性良好；
d.E2標(biāo)準(zhǔn)品梯度單獨(dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值平均變化在±10%以內(nèi)，表明E2標(biāo)準(zhǔn)品梯度熱穩(wěn)定性良好。
表1 E2各組分工作液熱穩(wěn)定性7天數(shù)據(jù)
序號 | E2標(biāo)準(zhǔn)品稀釋濃度（pg/mL） | 磁珠-包被E2抗體工作液37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值均值差異 | 吖啶酯標(biāo)記E2抗體工作液37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值均值差異 | 堿性磷酸酶標(biāo)記E2抗體工作液37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值均值差異 | E2標(biāo)準(zhǔn)品梯度37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值均值差異 |
S0 | 0 | 6.7% | -9.1% | -8.7% | 3.0% |
S1 | 5 | 5.8% | -8.2% | -8.3% | 0.7% |
S2 | 50 | 7.4% | -6.2% | -12.4% | -10.1% |
S3 | 250 | 6.6% | -6.7% | -12.7% | -6.6% |
S4 | 750 | 9.3% | -12.6% | -10.3% | 0.7% |
S5 | 1500 | 3.7% | -13.1% | -8.4% | -3.1% |
S6 | 3000 | 6.0% | -7.5% | -5.8% | -6.4% |
平均變化（不含S0） | 6.5% | -9.1% | -9.7% | -4.1% | |
3.臨床相關(guān)性
3.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺：
西寶生物發(fā)光（AE）平臺E2抗體配對組合1與羅氏診斷的E2試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的低值（＜300pg/mL）臨床樣本相關(guān)性R2＞0.90，相關(guān)性較好；與羅氏診斷的E2試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的高值（＜3000pg/mL）臨床樣本相關(guān)性R2＞0.95，相關(guān)性良好。
3.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺：
西寶生物發(fā)光（AP）平臺E2抗體配對組合2與羅氏診斷的E2試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的低值（＜300pg/mL）臨床樣本相關(guān)性R2＞0.90，相關(guān)性較好；與羅氏診斷的E2試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的高值（＜3000pg/mL）臨床樣本相關(guān)性R2＞0.95，相關(guān)性良好。
3.3熒光免疫層析平臺：
西寶生物熒光免疫層析平臺E2抗體配對組合3與羅氏診斷的E2試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的低值（＜300pg/mL）臨床樣本相關(guān)性R2＞0.90，相關(guān)性較好；與羅氏診斷的E2試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的高值（＜3000pg/mL）臨床樣本相關(guān)性R2＞0.95，相關(guān)性良好。
4.測試方案
4.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺
E2抗體配對組合1
待測抗原:E2標(biāo)準(zhǔn)品（貨號：DKY0347A）；
樣本:樣品加樣量10ul；
試劑1：雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測試；
試劑3：E2解離劑（AE發(fā)光專用）（貨號：DCH0213A）。
反應(yīng)條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul 試劑2+50ul試劑3，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測試。
測試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺
E2抗體配對組合2：
待測抗原:雌二醇（E2）標(biāo)準(zhǔn)品（貨號：DKY0347A）；
樣本:樣品加樣量10ul；
試劑1：雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測試；
試劑3：E2解離劑（AP發(fā)光專用）（貨號：DCH0213B）。
反應(yīng)條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2+50ul試劑3混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入底物，進(jìn)行測試。
測試使用發(fā)光儀器:迎凱Shine i2900。
4.3熒光免疫層析平臺
E2抗體配對組合3
待測抗原:E2標(biāo)準(zhǔn)品（貨號：DKY0347A）；
反應(yīng)條件：10ul樣品+100ul E2解離劑（層析專用，貨號：DCH0213C）（含E2熒光處理劑（層析專用），貨號：DCH0214A）混勻（無需等待解離），上樣，反應(yīng)時間（10min-15min）；
測試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。
5.產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 推薦配對 |
雌二醇（E2）抗體（E2 antibody) | EKY0342G | E2配對： 雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）包被羧基磁珠+雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）標(biāo)記吖啶酯+E2解離劑（發(fā)光專用）（貨號：DCH0213A）（發(fā)光配對組合1） 雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）包被羧基磁珠+雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）標(biāo)記堿性磷酸酶+E2解離劑（發(fā)光專用）（貨號：DCH0213B）（發(fā)光配對組合2） 雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）標(biāo)記熒光微球+雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）劃膜+E2解離劑（層析專用，貨號：DCH0213C）（含E2熒光處理劑（層析專用），貨號：DCH0214A）（熒光配對組合3） |
雌二醇（E2）抗體（E2 antibody) | EKY0342H | |
雌二醇（E2）標(biāo)準(zhǔn)品 | DKY0347A | |
雌二醇（E2）（貨號：EKY0342H）包被羧基磁珠濃縮液 | DKY1381A | |
雌二醇（E2）（EKY0342G）吖啶酯濃縮液 | DKY1381B | |
雌二醇（E2）（EKY0342G）標(biāo)記堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1381C | |
雌二醇（E2）（EKY0342H）標(biāo)記熒光微球濃縮液 | DKY1381D | |
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型） | DCD0517B | |
APS-5 發(fā)光底物液（即用型） | ECD0532M | |
羧基磁性微球，1um | DEG0852A | |
時間分辨熒光微球，羧基（300nm） | AEG0789E | |
雌二醇（E2）解離劑A（AE發(fā)光專用） | DCH0213A | |
雌二醇（E2）解離劑B（AP發(fā)光專用） | DCH0213B | |
雌二醇（E2）解離劑C（層析專用） | DCH0213C | |
雌二醇（E2）熒光處理劑（層析專用） | DCH0214A | |
蛋白保護(hù)劑GH | DCL0009A | 建議使用濃度為5%-10%。 |
1.項(xiàng)目背景
1.1臨床介紹
1.1.1雌二醇簡介
雌二醇（Estradiol，簡稱E2）是一種類固醇激素，屬于雌激素家族中活性最強(qiáng)、生物活性最高的成員。它在人體內(nèi)的主要來源如下：
女性：主要由卵巢的卵泡、黃體分泌，妊娠期婦女的胎盤也會大量產(chǎn)生。
男性：少量由腎上腺皮質(zhì)和睪丸間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生。
1.1.2臨床意義
雌二醇檢測在臨床中具有重要價值，主要用于以下幾個方面：
a.評估卵巢功能：通過檢測不同階段的雌二醇水平，結(jié)合卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）等指標(biāo)，可判斷卵巢的儲備功能、卵泡發(fā)育情況及排卵狀態(tài)。例如，卵泡期雌二醇水平過低可能提示卵巢功能減退。
b.診斷婦科疾?。河兄谠\斷多囊卵巢綜合征、卵巢早衰、閉經(jīng)、子宮內(nèi)膜異位癥等疾病。如卵巢早衰患者，雌二醇水平通常明顯降低，同時FSH升高。
c.監(jiān)測生育相關(guān)問題：在輔助生殖技術(shù)（如試管嬰兒）中，監(jiān)測雌二醇水平可指導(dǎo)促排卵治療，確定取卵時機(jī)，評估卵泡質(zhì)量。
d.孕期管理：妊娠期間，雌二醇水平會顯著升高，其變化可反映胎盤功能和胎兒發(fā)育情況。異常升高或降低可能與妊娠高血壓、先兆流產(chǎn)等風(fēng)險相關(guān)。
e.診斷內(nèi)分泌紊亂：雌二醇水平異常可能與甲狀腺功能異常、腎上腺疾病等內(nèi)分泌疾病有關(guān)，需結(jié)合其他檢查綜合判斷。
f.評估更年期癥狀：絕經(jīng)后女性雌二醇水平下降，可能出現(xiàn)潮熱、出汗、情緒波動、骨質(zhì)疏松等癥狀。檢測雌二醇可幫助評估更年期狀態(tài)，指導(dǎo)激素替代治療。
1.2小分子雙抗體夾心法
2024年公開專利CN117871874A《小分子物質(zhì)免疫檢測方法》對小分子夾心法的反應(yīng)原理做了詳細(xì)闡述，摘抄部分內(nèi)容如下。
本發(fā)明提出了一種小分子物質(zhì)免疫檢測方法，其特征在于，包括：（1）將含有小分子物質(zhì)的樣本、配體、第二抗體和表面活性劑進(jìn)行反應(yīng)，得到小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物，且所述小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物中小分子物質(zhì)誘導(dǎo)配體形成至少一個新的構(gòu)象表位，所述第二抗體可特異性結(jié)合所述至少一個新的構(gòu)象表位，所述表面活性劑可消除所述第二抗體與構(gòu)象未改變的配體之間的結(jié)合；（2）檢測所述小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物。
樣本中的小分子物質(zhì)與配體發(fā)生特異性結(jié)合，得到小分子物質(zhì)-配體復(fù)合物，并且小分子物質(zhì)-配體復(fù)合物中小分子物質(zhì)誘導(dǎo)配體形成至少一個新的構(gòu)象表位。小分子物質(zhì)-配體復(fù)合物與第二抗體和表面活性劑反應(yīng)，第二抗體特異性地與形成新構(gòu)象表位的配體結(jié)合，同時也會與構(gòu)象未改變的配體產(chǎn)生弱結(jié)合。表面活性劑可消除第二抗體與構(gòu)象未改變的配體之間的結(jié)合，得到小分子物質(zhì)-配體-第二抗體三元復(fù)合物。通過檢測三元復(fù)合物，可以實(shí)現(xiàn)小分子物質(zhì)檢測。由此，采用雙抗體夾心法可以提高檢測準(zhǔn)確性和靈敏度，不同濃度梯度樣本檢測區(qū)分度高。同時，減少了篩選高特異性復(fù)合物抗體的難度，更有利于小分子物質(zhì)檢測試劑盒的大規(guī)模生產(chǎn)和檢測，應(yīng)用價值高。
2.性能表現(xiàn)
針對E2的檢測，西寶生物推出2株E2抗體（小分子雙抗體夾心法）、1款E2標(biāo)準(zhǔn)品及3種解離劑。
具體性能如下（以下評估僅代表在西寶生物的工藝體系下的驗(yàn)證，建議客戶根據(jù)自身工藝進(jìn)行更為詳細(xì)的驗(yàn)證）。
2.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺
組合1：
雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）包被羧基磁珠+雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）標(biāo)記吖啶酯+E2解離劑（AE發(fā)光專用）（貨號：DCH0213A）；
線性范圍：5pg/mL-3000pg/mL；最低檢出限：5pg/mL；HOOK：100000pg/mL。
2.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺
組合2：
雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）包被羧基磁珠+雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）標(biāo)記堿性磷酸酶+E2解離劑（AP發(fā)光專用）（貨號：DCH0213B）；
線性范圍：5pg/mL-3000pg/mL；最低檢出限：5pg/mL；HOOK：100000pg/mL。
2.3熒光免疫層析平臺
組合3：
雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）標(biāo)記熒光微球+雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）劃膜+E2解離劑（層析專用，貨號：DCH0213C）（含E2熒光處理劑（層析專用），貨號：DCH0214A）；
線性范圍：20pg/mL-3000pg/mL；最低檢出限：20pg/mL；HOOK：50000pg/mL。
2.4各組分穩(wěn)定性評估
2.4.1采用E2磁珠稀釋液（化學(xué)發(fā)光）將磁珠包被的E2抗體濃縮液配制成工作液進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
2.4.2采用E2磁珠稀釋液（化學(xué)發(fā)光）將吖啶酯標(biāo)記的E2抗體濃縮液配制成工作液進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
2.4.3采用E2堿性磷酸酶稀釋液（化學(xué)發(fā)光）（含蛋白保護(hù)劑GH，貨號DCL0009A）將堿性磷酸酶標(biāo)記的E2抗體濃縮液配制成工作液進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
2.4.4采用E2標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液（化學(xué)發(fā)光）將E2標(biāo)準(zhǔn)品配制成梯度進(jìn)行37℃熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)；
如表1所示：
a.磁珠包被E2抗體工作液單獨(dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值平均變化在±10%以內(nèi)，表明磁珠包被E2抗體工作液熱穩(wěn)定性良好；
b.吖啶酯標(biāo)記E2抗體工作液單獨(dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值平均變化在±15%以內(nèi)，表明吖啶酯標(biāo)記E2抗體工作液熱穩(wěn)定性良好；
c.堿性磷酸酶標(biāo)記E2抗體工作液單獨(dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值平均變化在±15%以內(nèi)，表明堿性磷酸酶標(biāo)記E2抗體工作液熱穩(wěn)定性良好；
d.E2標(biāo)準(zhǔn)品梯度單獨(dú)37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值平均變化在±10%以內(nèi)，表明E2標(biāo)準(zhǔn)品梯度熱穩(wěn)定性良好。
表1 E2各組分工作液熱穩(wěn)定性7天數(shù)據(jù)
序號 | E2標(biāo)準(zhǔn)品稀釋濃度（pg/mL） | 磁珠-包被E2抗體工作液37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值均值差異 | 吖啶酯標(biāo)記E2抗體工作液37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值均值差異 | 堿性磷酸酶標(biāo)記E2抗體工作液37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值均值差異 | E2標(biāo)準(zhǔn)品梯度37℃熱加速7天與2℃-8℃儲存7天發(fā)光值均值差異 |
S0 | 0 | 6.7% | -9.1% | -8.7% | 3.0% |
S1 | 5 | 5.8% | -8.2% | -8.3% | 0.7% |
S2 | 50 | 7.4% | -6.2% | -12.4% | -10.1% |
S3 | 250 | 6.6% | -6.7% | -12.7% | -6.6% |
S4 | 750 | 9.3% | -12.6% | -10.3% | 0.7% |
S5 | 1500 | 3.7% | -13.1% | -8.4% | -3.1% |
S6 | 3000 | 6.0% | -7.5% | -5.8% | -6.4% |
平均變化（不含S0） | 6.5% | -9.1% | -9.7% | -4.1% | |
3.臨床相關(guān)性
3.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺：
西寶生物發(fā)光（AE）平臺E2抗體配對組合1與羅氏診斷的E2試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的低值（＜300pg/mL）臨床樣本相關(guān)性R2＞0.90，相關(guān)性較好；與羅氏診斷的E2試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的高值（＜3000pg/mL）臨床樣本相關(guān)性R2＞0.95，相關(guān)性良好。
3.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺：
西寶生物發(fā)光（AP）平臺E2抗體配對組合2與羅氏診斷的E2試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的低值（＜300pg/mL）臨床樣本相關(guān)性R2＞0.90，相關(guān)性較好；與羅氏診斷的E2試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的高值（＜3000pg/mL）臨床樣本相關(guān)性R2＞0.95，相關(guān)性良好。
3.3熒光免疫層析平臺：
西寶生物熒光免疫層析平臺E2抗體配對組合3與羅氏診斷的E2試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的低值（＜300pg/mL）臨床樣本相關(guān)性R2＞0.90，相關(guān)性較好；與羅氏診斷的E2試劑（電化學(xué)發(fā)光法）賦值的高值（＜3000pg/mL）臨床樣本相關(guān)性R2＞0.95，相關(guān)性良好。
4.測試方案
4.1化學(xué)發(fā)光（AE）平臺
E2抗體配對組合1
待測抗原:E2標(biāo)準(zhǔn)品（貨號：DKY0347A）；
樣本:樣品加樣量10ul；
試劑1：雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）標(biāo)記-吖啶酯稀釋物，用量50ul/測試；
試劑3：E2解離劑（AE發(fā)光專用）（貨號：DCH0213A）。
反應(yīng)條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul 試劑2+50ul試劑3，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液，進(jìn)行測試。
測試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2化學(xué)發(fā)光（AP）平臺
E2抗體配對組合2：
待測抗原:雌二醇（E2）標(biāo)準(zhǔn)品（貨號：DKY0347A）；
樣本:樣品加樣量10ul；
試劑1：雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）包被-磁珠稀釋物，用量50ul/測試；
試劑2：雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物，用量50ul/測試；
試劑3：E2解離劑（AP發(fā)光專用）（貨號：DCH0213B）。
反應(yīng)條件：
第一步：10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2+50ul試劑3混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入底物，進(jìn)行測試。
測試使用發(fā)光儀器:迎凱Shine i2900。
4.3熒光免疫層析平臺
E2抗體配對組合3
待測抗原:E2標(biāo)準(zhǔn)品（貨號：DKY0347A）；
反應(yīng)條件：10ul樣品+100ul E2解離劑（層析專用，貨號：DCH0213C）（含E2熒光處理劑（層析專用），貨號：DCH0214A）混勻（無需等待解離），上樣，反應(yīng)時間（10min-15min）；
測試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。
5.產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 推薦配對 |
雌二醇（E2）抗體（E2 antibody) | EKY0342G | E2配對： 雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）包被羧基磁珠+雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）標(biāo)記吖啶酯+E2解離劑（發(fā)光專用）（貨號：DCH0213A）（發(fā)光配對組合1） 雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）包被羧基磁珠+雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）標(biāo)記堿性磷酸酶+E2解離劑（發(fā)光專用）（貨號：DCH0213B）（發(fā)光配對組合2） 雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342H）標(biāo)記熒光微球+雌二醇（E2）抗體（貨號：EKY0342G）劃膜+E2解離劑（層析專用，貨號：DCH0213C）（含E2熒光處理劑（層析專用），貨號：DCH0214A）（熒光配對組合3） |
雌二醇（E2）抗體（E2 antibody) | EKY0342H | |
雌二醇（E2）標(biāo)準(zhǔn)品 | DKY0347A | |
雌二醇（E2）（貨號：EKY0342H）包被羧基磁珠濃縮液 | DKY1381A | |
雌二醇（E2）（EKY0342G）吖啶酯濃縮液 | DKY1381B | |
雌二醇（E2）（EKY0342G）標(biāo)記堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1381C | |
雌二醇（E2）（EKY0342H）標(biāo)記熒光微球濃縮液 | DKY1381D | |
AMPPD 發(fā)光底物液（即用型） | DCD0517B | |
APS-5 發(fā)光底物液（即用型） | ECD0532M | |
羧基磁性微球，1um | DEG0852A | |
時間分辨熒光微球，羧基（300nm） | AEG0789E | |
雌二醇（E2）解離劑A（AE發(fā)光專用） | DCH0213A | |
雌二醇（E2）解離劑B（AP發(fā)光專用） | DCH0213B | |
雌二醇（E2）解離劑C（層析專用） | DCH0213C | |
雌二醇（E2）熒光處理劑（層析專用） | DCH0214A | |
蛋白保護(hù)劑GH | DCL0009A | 建議使用濃度為5%-10%。 |
